Pemahaman terhadap karakteristik medium-medium untuk kultur jaringan hewan dan kemampuan menyiapkan medium dengan benar sangat penting bagi pelaku teknik kultur jaringan. Hal ini berkaitan erat dengan jenis teknik kultur yang akan dilakukan dan tujuan pembuatan kultur tersebut. Kegiatan praktikum penyiapan medium ini meliputi penyiapan medium cair dan penyiapan medium padat. Medium kultur jaringan ada yang tersedia dalam bentuk instan dan ada pula yang dapat dibuat dari embrio. Pada kegiatan ini dilakukan pembuatan medium kultur dari bahan instan dan dari embrio ayam.
2. Tujuan
Setelah melakukan kegiatan ini mahasiswa diharuskan:
a. Mamahami karakteristik masing-masing jenis medium untuk kultur jaringan hewan dan kepentingannya;
b. Dapat menyiapkan medium yang sesuai untuk melakukan teknik kultur yang diperlukan dengan benar;
c. Dapat memelihara medium dengan benar.
3. Prinsip
Medium merupakan faktor penting bagi pertumbuhan sel di luar sistem tubuh. Medium memberikan lingkungan ekstrasel yang mirip dengan kondisi asal sel tersebut di dalam tubuh serta menyediakan berbagai nutrien penting bagi sel. Komponen-komponen yang minimum harus ada di dalam medium adalah: bahan pembangun (lipid, berbagai asam amino, dan karbohidrat sederhana), sumber energi (karbohidrat sederhana), zat-zat mengatur aktivitas sel (berbagai mineral, enzim), bufer, dan antibiotik. Konsentrasi akhir dari larutan medium harus isotonis dengan sitoplasma dengan pH netral, non-toksik, dan steril. Penambahan antibiotik dilakukan untuk mencegah pertumbuhan mikroba yang masuk ke dalam medium selama medium dipergunakan. Jenis antibiotik yang dipakai bisa satu jenis yang mampu mencegah pertumbuhan bakteri (gram negatif dan gram positif) dan jamur, atau kombinasi antibiotik. Hal yang harus diperhatikan dalam pemakaian antibiotik adalah, bahwa jumlah antibiotik yang ditambahkan tidak boleh mengganggu aktivitas normal sel. Mengingat medium cair untuk kultur jaringan hewan mengandung berbagai asam amino dan protein yang tidak tahan panas, maka sterilisasi untuk medium cair dilakukan dengan menggunakan teknik filtrasi.
Arabiyatuna Arabiyatuna
